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以下是植物醇溶谷蛋白(ASP)ELISA試劑盒的實驗使用說明書，綜合整理自相關技術資料：
BS-4955 植物醇溶谷蛋白(ASP)ELISA試劑盒
一、實驗原理
采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。預先包被ASP捕獲抗體的微孔板中依次加入標本、標準品和HRP標記檢測抗體，經溫育洗滌后，通過TMB顯色反應(藍色→黃色)實現(xiàn)定量檢測，顏色深淺與ASP濃度呈正相關?。
二、樣本處理要求
血清?
采集后室溫靜置2小時或4℃過夜，1000×g離心20分鐘取上清
避免反復凍融，建議-20℃/-80℃保存?
血漿?
需使用EDTA/肝素抗凝劑，采集后30分鐘內2-8℃ 1000×g離心15分鐘?
組織勻漿?
建議使用預冷PBS(pH7.4)制備勻漿液?
三、操作步驟
將試劑平衡至室溫(約30分鐘)?
分別加入標準品、待測樣本至對應微孔(建議做復孔)?
加入HRP標記抗體，37℃溫育60分鐘?
洗板5次(每次靜置30秒棄液)?
每孔加入TMB顯色液，避光反應15分鐘?
加入終止液，15分鐘內450nm波長測OD值?
四、注意事項
保存條件?：試劑盒需2-8℃避光保存，有效期6個月?
安全規(guī)范?：
禁止用嘴吸取試劑?
避免接觸終止液/TMB，若接觸立即沖洗?
質量控制?：
板內變異系數(shù)<10%，板間<15%?
空白OD值應≤0.08?
五、結果計算
以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標繪制標準曲線，通過曲線方程計算樣本濃度?。檢測范圍通常為0.25-8ppm?。
(注：具體操作請以試劑盒內附說明書為準，本說明綜合了不同廠家的通用流程?)
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