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人CD14分子(CD14)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/8/22瀏覽:45次
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  人CD14分子(CD14)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  BS-9960 人CD14分子(CD14)ELISA試劑盒

  試劑盒組成

  預包被微孔板:96孔板,預包被抗CD14單克隆抗體(可拆卸式設計)

  標準品:凍干重組CD14蛋白(濃度梯度:9.375-600ng/mL,需用標準品稀釋液復溶)

  檢測抗體:生物素標記抗CD14多克隆抗體(100×濃縮液,需稀釋后使用)

  酶結(jié)合物:HRP標記鏈霉親和素(100×濃縮液)

  配套試劑:

  TMB顯色液(A/B液分裝)

  終止液(2M LS)

  洗滌緩沖液(30×濃縮,需稀釋)

  樣本稀釋液(含1% BSA的PBS緩沖液)

  樣本處理要求

  血清/血漿:EDTA抗凝,3000rpm離心10分鐘,避免溶血;建議稀釋倍數(shù)1:10-1:50

  細胞上清:離心去除顆粒物,直接檢測或-20℃分裝保存(避免反復凍融)

  組織勻漿:按1:9加入PBS(pH7.4)勻漿,離心取上清

  實驗步驟

  標準品梯度稀釋:用樣本稀釋液配制6個濃度梯度(最高濃度600ng/mL,9.375ng/mL)

  加樣孵育:

  每孔加入100μL標準品/樣本,37℃避光孵育90分鐘

  棄液后每孔加350μL洗滌緩沖液,重復洗滌5次

  顯色檢測:

  加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘

  洗滌后加入100μL酶結(jié)合物工作液,37℃孵育30分鐘

  加入TMB顯色15分鐘,終止液終止反應,450nm測OD值

  數(shù)據(jù)分析

  標準曲線:以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,四參數(shù)擬合法繪制曲線

  靈敏度:檢測限3.3ng/mL,線性范圍9.375-600ng/mL

  注意事項

  試劑盒保存:未開封時標準品-20℃保存,其他組分4℃或-20℃分裝(TMB顯色液需4℃避光)

  避免使用含NaN3的樣本,HRP活性會被yizhi

  實驗建議:同一批次完成檢測,不同數(shù)據(jù)不可直接比較

  注:以上資料僅供參考,如需產(chǎn)品具體資料請咨詢技術(shù)老師或品牌供應商。

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